Proč by se restrikční enzym neřízl?
Proč by se restrikční enzym neřízl?

Video: Proč by se restrikční enzym neřízl?

Video: Proč by se restrikční enzym neřízl?
Video: Restriction Enzymes (Restriction Endonucleases) 2024, Listopad
Anonim

Důvodů může být několik restrikční enzym neštěpí DNA, jak je uvedeno v tomto videu. Příprava DNA ke štěpení by měl nesmí obsahovat kontaminující látky, jako je fenol, chloroform, alkohol, EDTA, detergenty nebo nadměrné množství solí, které mohou interferovat s restrikční enzym aktivita.

Proč v tomto ohledu restrikční enzymy neštěpí bakteriální DNA?

Bakterie mít restrikční enzymy , také zvaný restrikčních endonukleáz , který střih dvouvláknová DNA v určitých bodech na fragmenty. Zajímavě, restrikční enzymy neštěpí své vlastní DNA . Bakterie zabránit svým vlastním DNA od sekat o restrikční enzym prostřednictvím methylace omezení stránky.

Někdo se také může ptát, kde se restrikční enzymy štěpí? Restrikční enzym Typy Obecně typ I enzymy řez DNA v místech vzdálených od rozpoznávací sekvence; Typ II střih DNA uvnitř nebo v blízkosti rozpoznávací sekvence; Typ III střih DNA blízké rozpoznávací sekvence; a Typ IV štěpí methylovanou DNA.

Podobně je položena otázka, co se stane, když přidáte příliš mnoho restrikčních enzymů?

Může dojít k neúplnému trávení když příliš mnoho nebo také málo enzym se používá. The přítomnost kontaminantů v a Vzorek DNA umět inhibovat enzymy což také vede k neúplnému trávení. Nějaký restrikční enzymy vyžadují pro plnou aktivitu kofaktory.

Proč můj restriktivní výtah nefunguje?

Neúplné nebo ne trávení v důsledku enzymové aktivity blokované metylací DNA. Pokud je váš enzym aktivní a tráví kontrolní DNA a a reakce je nastavena pomocí optimálních podmínek, ale stále vidíte problémy s trávení , může to být proto a enzym je inhibován methylací a templátová DNA.

Doporučuje: