Obsah:

Jak vložíte gen do plazmidu?
Jak vložíte gen do plazmidu?

Video: Jak vložíte gen do plazmidu?

Video: Jak vložíte gen do plazmidu?
Video: Plazmid DNA izolasyonu - M.B.G Teknikleri 2024, Listopad
Anonim

Základní kroky jsou:

  1. Rozřízněte plasmid a "vložit" do gen . Tento proces se opírá o restrikční enzymy (které štěpí DNA) a DNA ligázu (která spojuje DNA).
  2. Vložit a plazmid do bakterie.
  3. Vyrůst hodně plasmid -přenášející bakterie a používat je jako "továrny" na výrobu proteinu.

Také, jak může být gen vložen do plazmidu GCSE?

to je vložen do plazmidu pomocí ligázových enzymů. a plasmid jde do bakteriální buňku. transgenní bakterie se množí, což má za následek v miliony identických bakterií, které produkují lidský inzulín.

Navíc, jak subklonujete gen? Základní kroky pro Subklonování Uvolníte a vyčistíte svůj insert z rodičovského vektoru, ligujete tento insert do připraveného cílového vektoru, transformujete tuto ligační reakci na kompetentní bakteriální buňky. Poté prohledáte transformované buňky pro vložení.

Když to vezmeme v úvahu, jaké jsou 4 kroky klonování genů?

V klasických protokolech klonování štěpením restrikčními enzymy a ligací zahrnuje klonování jakéhokoli fragmentu DNA v podstatě čtyři kroky:

  • izolace DNA zájmu (nebo cílové DNA),
  • podvázání,
  • transfekce (nebo transformace) a.
  • prověřovací/výběrové řízení.

Jak amplifikujete plazmid?

Experimentální procedura

  1. Spusťte PCR a purifikujte produkt PCR: Spusťte PCR pro amplifikaci inzertové DNA.
  2. Strávte svou DNA:
  3. Izolujte svůj insert a vektor gelovým čištěním:
  4. Ligujte svůj insert do vašeho vektoru:
  5. Proměna:
  6. Izolujte hotový plazmid:
  7. Ověřte svůj plazmid sekvenováním:

Doporučuje: