Jak funguje Sangerovo sekvenování DNA?
Jak funguje Sangerovo sekvenování DNA?

Video: Jak funguje Sangerovo sekvenování DNA?

Video: Jak funguje Sangerovo sekvenování DNA?
Video: How does Sanger Sequencing Work? – Seq It Out #1 2024, Listopad
Anonim

Sangerovo sekvenování vede k tvorbě prodlužovacích produktů různé délky zakončených dideoxynukleotidy na 3 'konci. Prodlužovací produkty jsou poté separovány kapilární elektroforézou nebo CE. Molekuly jsou vháněny elektrickým proudem do dlouhé skleněné kapiláry naplněné gelovým polymerem.

Co je tímto způsobem Sangerova metoda sekvenování DNA?

Sangerovo sekvenování , také známý jako zakončení řetězu metoda , je technika pro Sekvenování DNA založené na selektivním začlenění dideoxynukleotidů ukončujících řetězec (ddNTP) pomocí DNA polymeráza během in vitro DNA replikace. Byl vyvinut Frederickem Sanger a kolegové v roce 1977.

Také, jak funguje sekvenování ukončení řetězce? Sangerova DNA sekvenování je také známý jako řetěz - ukončení metoda sekvenování . Výsledkem ddNTPs ukončení řetězce DNA, protože ddNTP postrádají 3'-OH skupinu potřebnou pro tvorbu fosfodiesterové vazby mezi nukleotidy. Bez této vazby, řetěz nukleotidů, které se tvoří, je ukončeno.

Jednoduše, proč děláme Sangerovo sekvenování?

Sangerovo sekvenování je A metoda z Sekvenování DNA založené na selektivním začlenění dideoxynukleotidů ukončujících řetězec pomocí DNA polymeráza během in vitro DNA replikace. Stále má výhodu oproti krátkému čtení sekvenování technologie (jako Illumina), které to umět vyrobit DNA sekvence čtení > 500 nukleotidů.

Je Sangerovo sekvenování přesné?

Sangerovo sekvenování s 99,99 % přesnost je „zlatým standardem“pro klinický výzkum sekvenování . Novější technologie NGS se však také stávají běžnými v klinických výzkumných laboratořích kvůli jejich vyšší propustnosti a nižším nákladům na vzorek.

Doporučuje: